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普欣生物是一家专注于重组蛋白研发、生产、并可为客户提供重组蛋白订制服务的高新技术企业。

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常见问题
common problem
1蛋白为什么要冻干?对蛋白的影响有哪些?
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A
蛋白质对热敏感,冻干能使蛋白质在存储过程中最大程度的保持活性,延长保存时间,同时也能降低运输成本.冻干对蛋白质的影响包括:可能造成蛋白质部分失活、聚集和其它变性问题。但可以通过添加保护剂(稳定剂,添加剂,辅料)和控制冻干的各种条件来尽可能降低这些负面的影响。 
2冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂?普欣常用的保护剂是什么?
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A
冻干对蛋白质的活性会有一定的影响,加入保护剂可以减小这种影响,最大程度上保护蛋白的活性。通常的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。本公司常用的保护剂有:海藻糖、甘露醇等。
3为什么有的蛋白带标签?
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A
带标签蛋白一般是为了满足部分客户的实验要求。如需His-tag和GST-tag,可以使用亲和纯化层析柱;与免疫球蛋白的Fc片段融合的蛋白可用于抗体研究等。
4蛋白如何定量的?
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A
通常采用BCA、Bradford和OD280三种方法来定量。
5为什么用我的定量方法测出来的结果与普欣标签上的定量不符?
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A
采用不同的蛋白定量方法,会有不同的结果。有时候定量方法不同造成的结果差异很显著。
6我购买了小包装冻干蛋白质,为什么收到货后只有一只空管?
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A
与市场上的有些蛋白产品不同,本公司绝大部分的产品中不含载体蛋白或其他添加物(如牛血清白蛋白(BSA),人血清白蛋白 (HSA)和海藻糖等),并且以最低含盐量的溶液冻干。因此,微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或几乎看不见的蛋白层,甚至蛋白粉末还会飘悬在管壁上。打开管盖前,我们建议在离心机中快速离心20-30秒,使附着在管盖或管壁的蛋白粉末聚集到管底。
7如何重溶(Reconstitute)冻干粉蛋白?
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A
除非说明书上有更具体的说明,我们建议采用以下方式:
(1)将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。
(2)短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。
(3)加入推荐的重溶缓冲液,达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打,这可能导致蛋白质变性。
(4)使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟,可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。
(5)每管体积不小于10μL分装,并按产品说明书上的指示储存。
(6)如果小瓶内呈现薄片或颗粒,则在室温下将产品混合几小时,然后在4℃过夜。
8如何确定蛋白活性实验参考用量?
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A
凡经过生物活性验证的蛋白产品,在我司产品页面均有活性验证信息,客户可在生物活性(Biological Activity)一栏中查看使用的细胞类型,ED50值等信息。
9为何ED50是一个范围?
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A
生物活性实验是对蛋白质的生物学反应的一种测量。因此,生物活性实验中的任何变化也可能导致不同的结果。这种变化可能包括细胞密度,细胞年龄,传代数,营养状况,培养基和所用的添加剂,以及实验操作者的操作手法。由于生物活性实验的可变性,同一蛋白质在不同情况下可能不会产生相同的ED50。因此普欣的蛋白质说明书上给出ED50的范围。
10产品的应用问题
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A
本公司的产品可以按照科研领域分类,但是对其具体应用并未给出明确指导。鉴于蛋白质根据其功能可以挖掘多重应用领域及应用方法,本公司推荐客户根据文献记载进行试验,或根据科学的研究,自行挖掘其应用方法。
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