• 溶解相关 FAQs

    如何对冻干蛋白质重新溶解和分装?

    严格遵守下述复溶冻干粉的方法,有助于确保蛋白或抗体活性的恢复:

    1) 轻敲或简单离心后再开盖,使粘在管壁或盖子上的冻干粉分离开。

    2) 使用产品说明书上推荐的缓冲液和存放浓度。如果您希望得到比推荐值更高的存放浓度,请使用至少100微升缓冲液以保证足够的体积覆盖管子内壁。使用室温下的缓冲液,可以获得最佳恢复效果。

    3) 加入缓冲液后,重新盖上盖子,用手轻轻来回颠倒管子,或者放置在慢速的摇床上,使得重溶缓冲液覆盖到管内所有表面。请勿使用涡流振荡器或使用移液器混合。

    4) 分装或使用前,请将管子置于室温环境下并轻晃15分钟。

    5) 复溶后的蛋白请存放在聚丙烯或硅管中。如需分装,建议每份不少于10微升。另外,要避免反复冻融。

  • 活性相关 FAQs

    1. 蛋白质干粉重溶时,说明书中提到用酸来溶解,会不会对蛋白质活性造成影响?

    用作细胞实验时,会伤害细胞吗?蛋白质使用说明书上推荐的溶解方法,会得到做好的溶解效果,保证蛋白质活性复原最完全。在您的使用过程中,此溶液被稀释成工作液或被目标缓冲液中和,小量的酸就不会对您的实验有影响。 


    2. 以ED50或units/mg标示比活性 (specific activity),两者之间有什么关联,怎么换算?

    半数有效浓度ED50的定义是可诱导50%最大反应的细胞因子浓度,这种活性表示法仅适用于剂量反应曲线呈S形的细胞因子。将ED50 (ng/ml)转化为比活性(units/mg)的公式为: 


    3. 哪些细胞因子有种属交叉活性?具体产品的种属交叉活性。

    答:除少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞,但比活性可能低于对应的人类细胞因子。而IL-7等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。干扰素,GM-CSF,IL-3和IL-4等细胞因子种属特异强,对非同源细胞几乎没有活性,相反成纤维细胞牛长因子(FGFs)和神经营养素(neurotrophins)高度保守,几乎在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。上述提示为一般情况,仅供参考。遇到具体的细胞因子,请通过文献确认种属特异性,或者依据您的实验结果得到准确信息。 


    4. 标签和蛋白质序列中多余的氨基酸会影响蛋白活性吗?

    这个需要具体情况具体分析。如果实验不需要标签,推荐客户买无标签产品。本公司蛋白纯化后,基本上没有多余的氨基酸残基。

12 >